如何规范的操作数字PCR仪？来看看莱尚生物科技是怎么做的吧

　　数字PCR仪是一种核酸分子一致定量技术。目前有三种方法用于核酸分子的定量，普通PCR半定量通过灰度进行定量；荧光定量PCR通过Ct(Cq)值进行相对定量；数字PCR是较新的定量技术，基于单分子PCR方法来进行计数的核酸定量，是一种一致定量的方法。主要采用微滴化方法，将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的微反应器或微滴中，每个反应器的核酸模板数少于或者等于1个。这样经过PCR循环之后，有一个核酸分子模板的反应器就会给出荧光信号，没有模板的反应器就没有荧光信号。根据数字PCR 反应单元总数和有荧光信号的单元数以及样品的稀释倍系数，就可以得到样本的最初拷贝数(浓度)。

　　注意：

　　1. Sock时，温度应设为10℃，时间不要超过30分钟。温度过高，时间过长，易导致仪器的损坏。

　　2. 操作时，要严格遵守以上原则，及时记录仪器运行的情况。

　　保养：

　　1．样品池的清洗

　　先打开盖子，然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡样品池5min，然后清洗被污染的孔；用微量移液器吸取液体，用棉签吸干剩余液体；打开PCR仪，设定保持温度为50℃的PCR程序并使之运行，让残余液体挥发去除。一般5～10min即可。

　　2．热盖的清洗

　　对于数字PCR仪，当有污染出现，而且这一污染并非来自样品池时；或当有污染或残迹物影响到热盖的松紧时，需要用压缩空气或纯水清洗垫盖底面，确保样品池的孔镜干净，无污物阻挡光路。

　　3．仪器外表面的清洗

　　清洗仪器的外表面可以除去灰尘和油脂，但达不到消毒的效果。选择没有腐蚀性的清洗剂对PCR仪的外表面进行清洗。

　　4．更换保险丝

　　先将PCR仪关机，拔去插头，打开电源插口旁边的保险盒，换上备用的保险丝，观察是否恢复正常。

　　维修：

　　1.PCR仪器需要定期检测，视制冷方式而定一般半年至少一次。

　　2.PCR反应的要求温度与实际分布的反应温度是不一致的，当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1～2℃时，可以运用温度修正法纠正PCR实际反应温度差。

　　3．PCR反应过程的关键是升、降温过程的时间控制，要求越短越好，当PCR仪的降温过程超过60s，就应该检查仪器的制冷系统，对风冷制冷的PCR仪要较*地清理反应底座的灰尘；对其他制冷系统应检查相关的制冷部件。

　　4．一般情况如能采用温度修正法纠正仪器的温度时，不要轻易打开或调整数字PCR仪的电子控制部件，必要时要请专业人员修理或利用仪器电子线路详细图纸进行维修。