数字PCR仪实现了定量及稀有等位基因的检测

　　数字PCR仪是一种核酸检测和定量分析的新方法，可以作为传统实时定量PCR的替代方法，以实现一致定量及稀有等位基因的检测。数字PCR的工作原理在于将DNA或cDNA样品分割为许多单独、平行的PCR反应，部分这些反应包含了靶标分子（阳性），而其他不包含（阴性）。单个分子可以被扩增一百万倍或更多。在扩增期间，TaqMan化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。当不存在任何靶标序列时，没有信号累积。PCR分析后，阴性反应片段用于生成样品中靶标分子的一致计数，而无需标准品或内标。

　　纳流芯片的使用提供了便捷和直观的机制来同时平行运行上千个PCR反应。每个孔都加入了样品、扩增混合物和TaqMan测定试剂的混合物，然后进行单独分析以检测存在（阳性）或不存在（阴性）终点信号。考虑到孔可能接收到多个靶标序列分子，使用泊松模型应用了一个校正因子。

　　数字PCR仪和试剂能够提高现有TaqMan测定的性能，从而实现更高的灵敏度、精度和一致定量，使应用从中获益。

　　PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内InVitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。在使用PCR仪的过程中需要注意以下事项：

　　1）环境要恒定，运作环境的温度不能过高或过低，在用空调的房间使用，有些PCR仪有温度保护程序，在过低的温度下机器不能启动。

　　2）电源要稳定，工作的电压不能波动过大，波动过大会造成电子器件损坏，一般建议将PCR仪电源接于稳压电源上。

　　3）尽量不要保存过夜，能经常使用就不容易坏。

　　4）数字PCR仪在使用前要详细阅读使用说明书，遇到不能解决的问题不要随意拆卸仪表，打电话咨询厂家或技术支持部门，通过指导进行维修。