梯度PCR仪跑胶有问题怎么办？

　　梯度PCR仪与普通PCR仪的区别在于温度的控制上面，普通PCR的孔所有温度是一样的，而梯度PCR仪却能够让不同的孔有不同温度，比如横向有12个孔，退火温度可以从低到高。

 

　　梯度PCR仪与普通PCR仪的区别主要是在功能上，而功能的体现主要是在温度上，而在性能上的体现确实大大不同的。由于传统的普通PCR仪一次只能运行一个特定的退火温度，因此如果要设置不同的退火温度，那么就需要多次运行才能够实现，这一过程需要花费大量的时间

 

　　PCR仪实际就是一个温控设备，能在95℃，55℃，72℃之间很好地进行温度控制，而梯度PCR仪的梯度也要做一下介绍，梯度实际上是指PCR时退火温度条件可以设置一系列不同的温度梯度，因此人们把这样的PCR仪称之为是梯度PCR仪。广泛应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等领域的一款仪器设备，在实验室中的应用频率很高，

 

　　PCR跑胶，目的条带很亮，但是边沿不清楚，前后有拖尾现象。出现这样的问题，则需要进行细致的分析，因为引起该问题的可能很多。可先检查是否模板质量问题，如有降解等，模板应避免反复冻融。

 

　　也有可能是抽提RNA时有污染，则需要重新抽提RNA。此外，也可能是非特异性扩增引发该问题，可提高退火温度，少循环次数。电泳缓冲液时间太长，ph值和盐离子浓度明显改变、电泳时电压太高、电泳液过久没换，电泳胶脏了等都可能引发该问题。

 

　　如果不是由上述原因引起，则进一步检查加样量是否过大，制胶过程中胶孔是否制好，EB是否冲洗干净、模板中是否混有基因组DNA或蛋白等。也需考虑是否扩增的条件不合适。针对具体原因再采取相应的措施。