数字放射自显影系统检测聚丙烯酰胺凝胶中的DNA

　　数字放射自显影系统采用PIM（平行电离倍增）技术，利用核素直接标记药物分子，突破了传统的乳胶感光成像，采用新气相传感技术，全数字化实时成像技术，可以将数月的曝光时间缩短至数小时，缩减实验时间，更快速得知标本中标记物的准确位置和数量，对标记上放射性的化合物进行定位或相对定量测定，达到高通量测试。用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。

 

　　数字放射自显影系统可以检测丙烯酰胺凝胶电泳分离的放射性DNA条带。含有放射性DNA的聚丙烯酰胺分析凝胶，在放射自显影前通常要固定和干燥。然而，若要从凝胶中回收放射性DNA条带，则不应固定和干燥。

 

　　数字放射自显影系统检测方法：

 

　　1、将凝胶及其附着的玻璃板于7%乙酸中浸5min。小心地从固定液中拿起玻璃板以取出凝胶。

 

　　2、去离子水短暂漂洗凝胶，用一叠Kimwipes纸蘸去凝胶表面多余的液体。

 

　　3、(可做或不做）将凝胶放在Whatman3MM纸上，用市售凝胶干燥机干燥。

 

　　4、将凝胶及支撑的玻璃板包在SaranWrap膜中，用梳子宽的一端或折叠的Kimwipe纸除去SaranWrap膜中的气泡或皱褶。

 

　　5、将放射性墨水或化学发光标准参照物标记的黏性小标签贴于SaranWmp膜表面，以便对准凝胶与胶片的位置。用透明胶带覆盖放射性墨水标签，以免污染胶片盒和增感屏。

 

　　6、将凝胶倒置，按以下步骤对X射线片（如KodakXAR-5或同类产品）曝光：

 

　　（1）在暗室里，用胶带将密封的凝胶与裁成玻璃板大小的一张X射线片粘在一起。

 

　　（2）用不透光的铝箔将凝胶与胶片包好。

 

　　（3）于室温或-70℃曝光合适的时间，增感屏使用与否均可。

 

　　（4）按制造商的建议显影、定影和干燥X射线胶片。